引物的作用(引物的作用是什么)

1. 引物的作用是什么

引物

引物，是指在核苷酸聚合作用起始时，刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子，与反应物以共价键形式连接，这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点，核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。

2. 什么叫引物

引物，是指在核苷酸聚合作用起始时，刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子，与反应物以氢键形式连接，这样的分子称为引物。

引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点，核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。

体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。

3. 引物的作用是什么高中

引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点，引导DNA的合成。

能设定循环次数，及控制复制次数。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30～40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。

4. 引物的作用是什么意思

引物，是指在核苷酸聚合作用起始时，刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子，与反应物以共价键形式连接，这样的分子称为引物。

引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补。

所有的DNA复制都是从一个固定起点开始的，而且目前所知的DNA聚合酶都只能延长DNA链而不能从头合成DNA链。DNA复制时，往往先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶从RNA引物3’末端开始合成新的DNA链。

作用机理：引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补。

在PCR（聚合酶链式反应）技术中，已知一段目的基因的核苷酸序列，根据这一序列合成引物，利用PCR扩增技术，目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环，延伸后得到的产物同样可以和引物结合。

5. 引物的本质及作用

1.DNA聚合酶一般特指以DNA为指导，消耗dNTP生成DNA的酶。

在原核生物中主要是Ⅰ和Ⅲ等五种，后者承担主要复制活性，不同亚基有不同功能；前者负责纠错和修复。

在真核生物中有非常多种DNA聚合酶，其中DNA pol α参与引物链的合成；DNA pol β参与SOS修复；DNA pol γ参与线粒体DNA复制，DNA pol δ和DNA pol ε分别参与后随链和前导链的复制，DNA pol δ还参与DNA损伤的修复。

2.RNA聚合酶以DNA为指导，消耗NTP生成hnRNA。

在原核生物中是一个大酶，有六个亚基。其中前五个在一起被叫做核心酶，第六个是σ因子，参与启动子的识别。

真核生物里RNA pol Ⅰ参与rRNA的合成；Ⅱ是最重要的，合成mRNA和一些sRNA；Ⅲ合成其他的sRNA。

3.逆转录酶有①依赖RNA的DNA聚合活性②核糖核酸酶H活性（用于水解tRNA引物）③依赖DNA的DNA聚合酶活性。也就是说，逆转录酶也是一种特殊的DNA聚合酶。

4.RNA复制酶很少提，易错高突变，很少需要引物。

硬是要说共同点的话..合成的方向都是3'→5'，化学本质都是蛋白质。毕竟第四个连合成场所都不一样，实在不好找共同点。

6. 引物的作用是什么呢

RT-PCR就是将RNA先反转录为cDNA，在将转录得到的cDNA作为模板进行PCR反应扩增目标片段。用于反转录的引物根据实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异引物的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA三种都可。

随机引物：适用于长的具有发卡结构的RNA。适用于rRNA、mRNA、tRNA等所有RNA的转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。

OligodT：适用于具有PolyA尾巴的RNA。（原核生物的RNA、真核生物的OligodTrRNA和tRNA不具有PolyA尾巴。）由于OligodT要结合到PolyA尾巴上，所以对RNA样品的质量要求较高，即使有少量降解也会使全长cDNA合成量大大减少。

基因特异引物：与模板序列互补，适用于目的序列已知的情况。

实时PCR也就是qPCR的基本原理与PCR也是一样的，只是在体系中加入荧光指示，可以对PCR的模板进行定量。

一种是加入荧光染料SYBRGreen，SYBRGreen会嵌入双链DNA的小沟，且只有在嵌入小沟时才会发出荧光，荧光定量PCR没进行一个循环就会对产物进行一次检测，通过检测每个循环后荧光强度（间接得知DNA的量）从而检测整个PCR的过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。SYBRGreen不具有特异性，对结果稍有影响。

另一种是加入荧光探针Taqman，PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taqman探针在PCR体系中会与目标片段杂交，而在PCR的Extension阶段Taq酶以一条链为模板合成目标片段，此时Taq酶的5'－3'外切酶活性将结合在模板上的探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。Taqman特异性强，只有被扩增出目标片段时，才有荧光发出，但是价格昂贵。

7. 引物是用来做什么的

引物是短的寡核苷酸片段，充当DNA复制的起点。因为几乎所有DNA聚合酶都不能从头合成，所以它们需要一个3’-羟基作为DNA合成的起始点。这个3’-羟基由相配的引物提供。

在体内，由于DNA聚合酶的忠实性，不能从头合成DNA，因此只能由RNA聚合酶（称为引物酶）生成，采用RNA引物来延伸，在延伸过程中，RNA引物降解并由DNA取代。

在体外PCR反应中所用到的DNA引物，是根据不同的要求及模板序列设计，然后用化学法人工合成的，与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸；对于大多数PCR反应，决定整个反应成功与否的最重要因素是引物的序列和质量。

8. 引物作用原理是怎样的

这可能与尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。

RNA有3‘OH是一个原因，最主要的是RNA是单链，而且容易被降解。机体选择RNA做引物是为了避免错配，因为即使引物RNA的碱基序列出现差错，可以很容易被降解，然后通过DNA的修复功能即可复制出正确的序列，是一种保护机制。如果是DNA做引物则不容易被降解。我们体外对DNA进行扩增时则是使用的DNA引物，因为DNA引物不容易被降解。