试管时辅酶的作用是什么(辅酶和辅基有什么不同,在酶促反应中起什么作用)

1. 辅酶和辅基有什么不同,在酶促反应中起什么作用

辅因子

辅因子：（Cofactor）是指与酶（酵素）结合且在催化反应中必要的非蛋白质化合物。某些分子如水合部分常见的离子所扮演的角色和辅因子相当类似，但由于含量不受限制且普遍存在，因此不归类为辅因子。

辅因子：一般指体结合酶的非蛋白部分,按其与酶蛋白结合的紧密程度不同可分为辅酶和辅基两类。

2. 酶的辅基和辅酶有什么不同

辅基与酶蛋白结合较为紧密，不能通过透析或超滤的方法除去。在酶促反应中，辅基不能离开酶蛋白。

酶的辅助因子按其与酶蛋白结合的紧密程度与作用特点不同可分为辅酶（coenzyme）与辅基（prosthetic group）。辅酶与酶蛋白的结合比较疏松，可以用透析或超滤的方法除去。在酶促反应中，辅酶作为底物接受质子或基团后离开酶蛋白，参与另一酶促反应并将其所携带的质子或基团转移出去，或者相反。辅助因子多是金属离子或小分子有机化合物。金属离子是最常见的辅助因子，约2/3的酶含有金属离子。

3. 辅酶和辅基在酶促反应中的作用

辅酶：

1.硫胺素：即维生素B1。它在生物体内的辅酶形式是硫胺素焦磷酸 (TPP)硫胺素焦磷酸过去也称为辅羧酶。它在动物糖代谢中起着重要作用，例如丙酮酸在脱羧作用时需要它。在TPP缺少的情况下,代谢中间物丙酮酸不能顺利脱羧会积聚于血液和组织中而出现神经炎。

2.核黄素：即维生素B2。参与组成两种辅酶,是细胞内的氧化还原系统的主要成分,它们是黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。FMN和FAD是一系列黄素连接的氧化还原酶或称为黄素蛋白类的辅酶。这些酶中有的除了FMN或FAD外，这些酶催化一系列可逆或不可逆的细胞中的氧化还原反应。

3.吡哆醛及其衍生物：即维生素B6。维生素B6参与形成两种辅酶，即吡哆醛磷酸和吡哆胺磷酸。

需要吡哆醛磷酸或吡哆胺磷酸作为辅酶的酶在氨基酸代谢中特别重要，催化转氨、脱羧以及消旋作用等。

4.泛酸:即维生素B5,泛酸的辅酶形式是辅酶A（CoA或CoASH）,是酶促乙酰化作用的辅助因，作为酰基的载体或供体，在代谢上尤其是脂肪酸的代谢上甚为重要

5.生物素：即维生素H，属于B族维生素，B7,需要生物素的酶类能催化二氧化碳的参入 (羧化作用)或转移,因而生物素和二氧化碳的固定密切相关。在羧化作用时还需要腺苷三磷酸(ATP)和镁离子的存在,此外生物素在蛋白质生物合成中以及转氨基作用中也起着重要作用。

6.叶酸:即维生素B9，叶酸的辅酶形式是四氢叶酸，它作为酶促转移一碳基团的中间载体而在嘌呤类、丝氨酸、甘氨酸和甲基基团的生物合成中起作用。此外，叶酸在核蛋白的生物合成上也是不可缺少的。

7.氰钴胺素:即维生素B12，作为辅酶时,维生素B12中的CN被5'-脱氧腺苷基团所代替,称为辅酶B12。在二羧酸的异构作用中，例如在谷氨酸转化为甲基天冬氨酸的酶促反应中，在乙二醇和甘油转化为醛类，生物合成甲基基团以及核苷的合成中需要辅酶B12。

8.维生素PP:烟酸，也称维生素B3，是吡啶的衍生物，包括尼可酸及尼可酰胺。尼可酰胺在体内与核糖、磷酸、腺嘌呤组成尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)。 NAD+和NADP+，是多种不需氧脱氢酶的辅酶，分子中的尼可酰胺部分具有可逆的加氢及脱氢特性，在反应中起递氢作用。

9.硫辛酸:硫辛酸作为辅酶，在两个关键性的氧化脱羧反应中起作用，即在丙酮酸脱氢酶复合体和α-酮戊二酸脱氢酶复合体中，催化酰基的产生和转移。

4. 辅酶在反应中的作用是什么

1、与酶蛋白结合紧密程度不同

辅酶和辅基的主要区别在于与酶蛋白结合的紧密程度不同，非蛋白质部分与酶蛋白结合松散称为辅酶，非蛋白质部分与酶蛋白结合牢固的称为辅基。

2、分离方法不同

经透析或超滤方法可使辅酶与酶蛋白分离；而辅基与酶蛋白结合紧密，不能通过透析或超滤方法除去。

3、游离性不同

辅酶可以以不与酶结合的形式存在，并可结合成为多种酶的辅酶，它的游离特性在功能上保证了辅酶的运载能力。在酶促反应中，辅酶作为底物接受质子或基团后离开酶蛋白，参与另一酶促反应并将其所携带的质子或基团转移出去，或者相反。

在酶促反应中，辅基不能离开酶蛋白。酶失去了辅基就无法实现功能，失去了活性；而离开了酶辅基也无法单独存在。

5. 辅酶和辅基有什么不同?在酶催化反应中起什么作用?

酶和酶作用底物

（一）酶的要求：

一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合：

1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。

2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。

3.作用专一性强 ，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。

4.易与抗体或抗原偶联 ，标记后酶活性保持稳定，且不影响 标记抗原与抗体的免疫反应性 。

5.酶、辅助因子及其底物对人体无害 ，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物应价廉易得。

（二）常用的酶

1.辣根过氧化物酶（HRP）：

目前酶联免疫吸附试验中应用最广泛 的标记用酶。

由无色的糖蛋白(主酶)和亚铁血红蛋白(辅基)结合而成的复合物。

辅基是酶活性基团 ，而主酶则与酶活性无关 ，HRP的纯度用RZ(HRP分别在403nm和275nm处的吸光度比值)表示，RZ值应大于3.0 。

RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量 ，并非表示HRP制剂的真正纯度，而且RZ值高的HRP并不意味着酶活性也高，RZ值与酶活性无关 。

酶活性以单位U表示： 即1分钟将1μmol底物转化为产物所需的酶量。酶变性后，RZ值不变但活性降低 ，因此使用酶制剂时，酶活性单位比RZ值更为重要。

6. 辅酶和辅基可以直接参与酶促反应

辅酶：

1.硫胺素：即维生素B1。它在生物体内的辅酶形式是硫胺素焦磷酸 (TPP)硫胺素焦磷酸过去也称为辅羧酶。它在动物糖代谢中起着重要作用，例如丙酮酸在脱羧作用时需要它。在TPP缺少的情况下,代谢中间物丙酮酸不能顺利脱羧会积聚于血液和组织中而出现神经炎。

2.核黄素：即维生素B2。参与组成两种辅酶,是细胞内的氧化还原系统的主要成分,它们是黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。FMN和FAD是一系列黄素连接的氧化还原酶或称为黄素蛋白类的辅酶。这些酶中有的除了FMN或FAD外，这些酶催化一系列可逆或不可逆的细胞中的氧化还原反应。

3.吡哆醛及其衍生物：即维生素B6。维生素B6参与形成两种辅酶，即吡哆醛磷酸和吡哆胺磷酸。

需要吡哆醛磷酸或吡哆胺磷酸作为辅酶的酶在氨基酸代谢中特别重要，催化转氨、脱羧以及消旋作用等。

4.泛酸:即维生素B5,泛酸的辅酶形式是辅酶A（CoA或CoASH）,是酶促乙酰化作用的辅助因，作为酰基的载体或供体，在代谢上尤其是脂肪酸的代谢上甚为重要

5.生物素：即维生素H，属于B族维生素，B7,需要生物素的酶类能催化二氧化碳的参入 (羧化作用)或转移,因而生物素和二氧化碳的固定密切相关。在羧化作用时还需要腺苷三磷酸(ATP)和镁离子的存在,此外生物素在蛋白质生物合成中以及转氨基作用中也起着重要作用。

6.叶酸:即维生素B9，叶酸的辅酶形式是四氢叶酸，它作为酶促转移一碳基团的中间载体而在嘌呤类、丝氨酸、甘氨酸和甲基基团的生物合成中起作用。此外，叶酸在核蛋白的生物合成上也是不可缺少的。

7.氰钴胺素:即维生素B12，作为辅酶时,维生素B12中的CN被5'-脱氧腺苷基团所代替,称为辅酶B12。在二羧酸的异构作用中，例如在谷氨酸转化为甲基天冬氨酸的酶促反应中，在乙二醇和甘油转化为醛类，生物合成甲基基团以及核苷的合成中需要辅酶B12。

8.维生素PP:烟酸，也称维生素B3，是吡啶的衍生物，包括尼可酸及尼可酰胺。尼可酰胺在体内与核糖、磷酸、腺嘌呤组成尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)。 NAD+和NADP+，是多种不需氧脱氢酶的辅酶，分子中的尼可酰胺部分具有可逆的加氢及脱氢特性，在反应中起递氢作用。

9.硫辛酸:硫辛酸作为辅酶，在两个关键性的氧化脱羧反应中起作用，即在丙酮酸脱氢酶复合体和α-酮戊二酸脱氢酶复合体中，催化酰基的产生和转移。

7. 酶与辅基的主要区别是

酶蛋白决定酶催化的专一性，辅助因子通常是作为电子，原子或某些集团的载体决定酶促反应的性质 辅助因子（根据与酶蛋白结合的牢固程度）可分为辅基（与酶蛋白结合疏松可以用透析，超滤的方法）和辅酶（与酶蛋白结合紧密不可以通过透析，超滤的方法除去） 按组成可以分为金属离子（传递电子原子或基团，稳定酶的构象，在酶与底物中起桥梁的作用，构成酶的活性中心，中和阴离子降低反应中的静电斥力) 小分子有机物（主要参与 酶的催化作用在 催化中起着电子，原子或某些化学基团的传递的作用。)

8. 辅基和辅酶在酶催化反应中起什么作用

辅因子是指与酶(酵素)结合且在催化反应中必要的非蛋白质化合物.是的，可以这么认为，注意辅酶与辅基的区别，前者与脱辅蛋白结合较疏松，后者与脱辅蛋白结合较紧密。

辅因子包括金属离子和一些分子量不大的有机化合物。一般常见的金属离子有锌离子(Zn2+)、镁离子(Mg2+)、铁离子(Fe2+)、铜离子(Cu2+)等，例如醇脱氢酶含锌、精氨酸酶含锰、而多酚氧化酶则含铜等。 与酶蛋白紧密结合的辅因子称为辅基。酶的纯蛋白部分相对于辅因子而言，则称为脱辅基酶蛋白或简称酶蛋白。无论辅酶或脱辅基蛋白在单独存在时都不显示酶活力。 有不少酶既含有金属辅因子也含有辅酶。许多辅酶是维生素或维生素的衍生物。