霉蛋白酶的作用(霉蛋白酶的作用与功效)

1. 霉蛋白酶的作用与功效

凝乳是乳制品获得凝结(凝固)牛奶与法国产苹果或可食酸性物质这样柠檬汁或对醋然后排去液体部分(叫乳清)。

挤奶被留下乳酸(原料乳单独或加热杀菌牛奶与增加乳酸细菌)将自然地也生产凝乳，和酸乳乳酪也是这样生产。增加的酸度导致奶蛋白质(酪蛋白)凝结成固体或者“凝乳”。凝乳，只包含乳清蛋白质，是乳清。在牛奶，80%蛋白质是酪蛋白。凝乳产品的名称因地域不同称呼也不同，包括酸奶干酪，夸克(由细菌有时也凝结和法国产苹果)和对 paneer(凝结用柠檬汁)。

2. 酸性蛋白酶的作用与功效

酸性蛋白酶是指蛋白酶具有较低的最适pH，而不是指酸性基团存在于酶的活性部位，酸性蛋白酶的最适PH在2～4左右。在酶的活性部位中含有一个或更多的羧基.这一类蛋白酶中研究最彻底的是胃蛋白酶.

(1)酸性蛋白酶的pH适应性

酸性蛋白酶的最适pH为2.5 ~5.0，但不同微生物的酶稍有差异

(2)酸性蛋白酶的温度适应性

酸性蛋白酶的适宜温度为30- 50 °C最适作用温度为40。C左右。

在温度较低时，酶活性随温度的上升而增大，在温度达到酶的最适温度后，酶活力随温度升高而急剧下降，失活很快。一般50 。C以下可保持稳定，但随产酶微生物菌种不同而有所差异。

(3)酸性蛋白酶的抑制剂

酸性蛋白酶活性中心含有2个天冬氨酸残基，因此大多数抑制剂可通过酯化作用而迅速使之钝化，使酸性蛋白酶失活。酸性蛋白酶-一般对重氮化合物、十二烷基硫酸钠(SDS)以及1，2-环-3-对硝基苯氧基丙烷(EPNP)敏感，而对异丙氟磷酸(DFP)、对氯汞苯甲酸(CMB)及乙二胺四乙酸(EDTA)不敏感。

(4)金属离子对酸性蛋白酶的影响

Ag+对酸性蛋白酶有轻度抑制作用，而Cu2+、Mn2+对其有激活作用

3. 蛋白酶功效和作用

水解蛋白质肽键的一类酶的总称。按其水解多肽的方式，可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断，形成分子量较小的月示和胨。外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解，而游离出氨基酸，前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶。按其活性中心和最适pH值，又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。按其反应的最适pH值，分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。工业生产上应用的蛋白酶，主要是内肽酶。

蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。

催化蛋白质水解的酶类。种类很多，重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性，一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键，如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。蛋白酶分布广，主要存在于人和动物消化道中，在植物和微生物中含量丰富。由于动植物资源有限，工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物发酵制备。

胰蛋白酶的作用

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。

1.称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25%，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。

2.用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。

胰蛋白酶能够催化蛋白质的特定肽键水解，这个催化过程是不需要能量的，不会使酶失去活力，也不会改变形状和使自身水解。底物与酶的活性中心的结合是可逆的，这种结合使得蛋白质特定肽键因弯曲变形而被活化，更易于受到水分子的攻击，分别形成氨基和羧基而断裂，得到小分子多肽或氨基